pcr的原理是什麽？

PCR的原理是生物聚合酶鏈式反應。PCR技術的基本原理類似於DNA的自然復制過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR是基於DNA在體外95℃變性成為單鏈的事實。在低溫下(常為60℃左右)，引物和單鏈根據堿基互補配對原理結合，然後將溫度調節到DNA聚合酶的最適反應溫度(約72℃)，DNA聚合酶沿著從磷酸到五糖(5’-3’)的方向合成互補鏈。

pcr反應的特點:

1.特異性強。

引物與模板的結合和引物鏈的延伸遵循堿基配對的原理。由於聚合酶合成反應的保真性和TaqDNA聚合酶的耐高溫性，反應中模板和引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，擴增的目的基因片段可以保持較高的準確性。通過選擇特異性高、保守的靶基因區域，其特異性會更高。

2.高靈敏度。

PCR產物量呈指數級增加，可以將待測初始模板按皮克(pg=10-12)級擴增到μg=-6的水平。可以從654.38+0萬個細胞中檢測出壹個目標細胞；在病毒檢測中，PCR的靈敏度可達3 RFU(空斑形成單位)；在細菌學中，最低檢出率為3個細菌。

3.簡單快捷。

耐高溫Taq DNA聚合酶用於PCR反應。反應液壹次性加入後，在DNA擴增液和水浴鍋中進行變性-退火-延伸反應，擴增反應壹般在2 ~ 4小時內完成。擴增產物壹般用電泳分析，不需要同位素，所以沒有放射性汙染，易於推廣。

4.純度要求低。

不需要分離病毒或細菌和培養細胞，可以用粗DNA和RNA作為擴增模板。可直接用於血液、體腔液、漱口液、頭發、細胞、活組織等臨床標本的DNA擴增和檢測。

百度百科-聚合酶鏈反應

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